Diabetologia：激活但特性受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次用到肝细胞免疫反应到用到1型式高血压药理学呕吐的的演进率在幼儿时期就有很好的描绘，多个肝细胞免疫反应阳性的幼儿之中有70%在血清转换后10短期内患上高血压，而随访15年的幼儿这一数量提高到84%。相比之下，占到药理学1型式高血压一半以上的型式1型式高血压的肺癌机制还不会给予更好的研究工作。

越来越多的人开始运用于依此的系统来假设1型式高血压的的演进：变异在用到多种肝细胞免疫反应时踏入第1收尾，用到血糖异常时踏入第2收尾，用到呕吐时踏入第3收尾。一些多发肝细胞免疫反应阳性的变异，在1期和2期，的演进较较慢，并演进为肺癌的1型式高血压。我们之后描绘了各别在首次侦测到多种肝细胞免疫反应检验后至不算10年无高血压的亦非较慢的演进者，这小组病症人数不算，但特性非常明确。随后，我们发掘出肝细胞自身复合物免疫CD8+T细胞内反应在的演进缓较慢的病症之中必需不不存在，但在近来肺癌和肇因的高血压病症之中很容易侦测到。这可能得出结论，与的演进病症相比，这些病症免疫反应的可调增强。

早期研究工作得出结论，尽管可调性T细胞内(Treg)数量正常，但高血压病症不存在一些功用缺陷，其之中还包括对IL-2的反应控制能力提高。此外，高血压病症之中的现像CD4+T细胞内可能对可调更为重要抵抗性，乏善可陈为现像T细胞内的减缓减弱，连续性导致的Treg和胃导致的诱导Treg，以及复合物经历的CD4+T细胞内之中IL-2反应减弱。本研究工作的目的是描绘了CD4+可调性T细胞内(Treg)在一小群亦非缓较慢的演进者之中的特性，他们的半数为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX研究工作是一项以人群的系统化的纵向研究工作，在21岁以下胃癌的病症子女之中定期检查1型式高血压的危险因素。我们之后描绘了长期缓较慢的演进者的特性，他们维持多重肝细胞免疫反应阳性超过10年，但不会用到高血压的药理学呕吐，较慢性或非透过性免疫。随后，10名继续维持无高血压并主动提供大量血浆检验的缓较慢的演进者纳入T和B细胞内功用系统性。在目前的研究工作之中，8名较慢的演进者(SP小组)，之中位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁中间的肝细胞免疫反应阳性。所有的行动者都处于1型式高血压的演进的1期，尽管一些人随后失去了肝细胞免疫反应对某些复合物的阳性反应，然而，一名病症已经处于2期至不算6年，但不会用到药理学呕吐，一名病症被诊断为高血压，该受试者72岁，在挖掘出试验中检验时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据系统性之中对该ADP透过了实际上审核。分离外周血单个核细胞内(PBMCs)，采用多参数流式细胞内术和T细胞内减缓试验审核ADP之中Treg的基频、基因型式和功用。运用于FlowSOM和CITRUS(聚类断定、表征和回归)透过无督导聚类系统性，审核Treg基因型式。

结果：与肥胖症ADP相比，来自较慢的演进体的心灵CD4+T细胞内的督导聚类说明了，触发的心灵CD4+ Treg基频提高，与糖皮质激素诱导的TNFR具体蛋白(GITR)强调提高有关。一名HbA1c升高的病症与的演进缓较慢者和转换的折衷小组相比，Treg著者有所完全相同。功用系统性得出结论，与肥胖症ADP相比，来自缓较慢的演进体的Treg介导的CD4+现像T细胞内减缓相比受损。乏善可陈为对现像CD4+T细胞内CD25和CD134强调的减缓提高。

三幅1 深入的基因型式系统性说明了，CD4+Treg变异式在较慢的演进表头之中提高。由FlowSOM降解的Treg室，周围在来自所有ADP的活命CD4+CD45RA -细胞内上。根据标示出物强调断定出10个元簇:心灵T细胞内_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T细胞内;HLA-DR + GITR +心灵T细胞内;磁盘Treg_1;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;和磁盘Treg_4。(a)运用于9个完全相同Treg标示出降解的10个元簇的MST。每个路由表均是由一个一个大(100个一个大)，大得多的元一个大(10个元一个大)在路由表小组附近上色。每个路由表之中的糕点三幅说明单个标示出的强调级别。(b)每个元聚类的热三幅，以说明了整体标示出强调。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)降解三幅，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对于金属量为每个metacluster装有支示意三幅(金属量> 0.05%)未确定为HD和SP小组:磁盘Treg_2 (e),磁盘Treg_3 (f),磁盘Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T细胞内(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T细胞内(l)。绿色圆圈均是由人口为120人SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对大写字母秩检验。此键适用于三幅形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

三幅2 运用于CITRUS的估测式属实，Treg基频的提高是的演进缓较慢的logo。分级离子通道(a - f)和柑橘系统性(g-k)相当SP行动者和转换的HD行动者在CD4+CD45RA−T细胞内上的差异。(a)未成熟CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群体的均是由性三幅。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR强调透过分离，模拟FlowSOM群体。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)小组以及ADPSP 606(绿色)之中CD25+ cd127的基频简介三幅。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+离子通道子集的装有支示意三幅;(c) HLA-DRloGITR−(磁盘Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(磁盘Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(磁盘Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+磁盘T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3强调强度着色，箭头突出的簇被识别为SP和HD表头中间的完全相同。(j)装有支示意三幅说明了了在SP(蓝点)和HD(灰点)小组之中，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的相对于金属量(数量)。(k)直方三幅说明了每个簇的基因型式(紫色)和Treg标示出相对于强调与着重强调(紫色);上列，磁盘Treg_3;下面动身，磁盘Treg_4。着重与所有其他簇之中标示出的强调有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对大写字母秩检验

三幅3 与肥胖症献血者相比，的演进缓较慢者心灵treg的GITR提高。每个心灵CD4+T细胞内元簇(心灵T细胞内_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T细胞内;HLA-DR + GITR +心灵T细胞内;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)侦测每个强调标示出的推移。(a,b)来自HD (a)和S (b)表头的强调热三幅(sp606不还包括在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇之中所有HD(黄色)、所有SP(紫色)和SP 606(绿色)的FlowSOM GITR强调接在，说明了直方三幅(c)和简介三幅(d)。Wilcoxon配对大写字母秩和检验，p< 0.07(绿色)所有ADP还包括，p< 0.05(紫色)ADPSP 606和转换的HD不还包括在测试之中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之中GITR强调，从分级离子通道，从所有HD(黄色)、所有SP(紫色)和SP 606(绿色)接在，说明了直方三幅(e)和简介三幅(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对大写字母秩检验

三幅4 来自缓较慢的演进的CD4+ treg细胞内控制现像CD4+T细胞内的控制能力提高。SP小组用紫色的支线和圆圈说明，HD小组用黑色的支线和圆圈说明，绿色的支线/圆圈说明ADPsp606。运用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内透过分选。CD4+CD25−(需要的话者)被标示出为CFSE, Treg按辨别的数量溶液。用抗CD3 /28微珠活命化细胞内，培育3天后透过流式细胞内术侦测。(a-d)与CD4+需要的话者相对于应的treg培育(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD需要的话者培育。(a,b,f) CFSE裂解(a,e)和CFSE减缓百份(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的减缓百份。运用于阳性折衷(触发的小组织起来细胞内不含treg)数值减缓百份。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相当测试

三幅5 现像CD4+T细胞内对缓较慢的演进的T细胞内活命化的减缓更敏感性。SP小组用紫色的支线和圆圈说明，HD小组用黑色的支线和圆圈说明，绿色的支线/圆圈说明ADPsp606。运用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内透过分选。CD4+CD25−(需要的话者)被cfsel标示出，treg按辨别的数量溶液。用抗CD3 /28微珠活命化细胞内，培育3天后透过流式细胞内术(CD25反染)和细胞内因子系统性。HD Treg与HD、SP或sp606需要的话者共同培育。(a,b) CFSE裂解(a)和CFSE减缓次之(b)。(c,d) CD25减缓次之(c)和CD134减缓次之(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在大一之中的强调。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相当测试

得出结论：我们得出的得出结论是，来自缓较慢的演进子的活命化心灵CD4+Treg在GITR强调之中给予了扩张和丰富，阐释了必要性研究工作Treg在1型式高血压安全性变异之中的一般而言的必要性。

原文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28